2 方法
2.1 模型制备及分组取无眼疾的健康新西兰家兔30只,随机取出6只作为空白组,余下24只动物每只兔眼用微量进样器分别滴入斑蝥酊50μl,1次/d,连续3 d,末次刺激后30 min随机分为4组,分别为模型组,阳性药对照组,野菊花组(低、高2个剂量)。
2.2 给药各组分别给兔眼打分后即刻用药(正常对照组和模型对照组不用药)。阳性药对照组滴眼4次/d,每眼100 μl/次;野菊花水煎剂高剂量组滴眼4次/d,每眼100μl/次,低剂量组滴眼2次/d,每眼100 μl/次;连续给药5d。
2.3 观察与结果分析每隔24 h分别经肉眼观察后,给兔眼结膜打分(见表1),最终取平均分值进行统计学处理。末次给药24 h后处死动物,每只动物取一只眼结膜并用10%甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色,进行病理组织学检查。表1 结膜刺激反应评分标准(略)
所有实验数据均以±s表示,资料分析采用多个独立样本的秩和检验。
3 结果
3.1 野菊花水煎剂对家兔刺激性结膜炎影响的肉眼观察情况实验时,发现兔眼滴入斑蝥酊后均呈现出闭眼,躁动等痛苦症状。用药前除空白组外,各组动物造模成功,均出现明显的炎症反应。表现为:眼结膜充血、水肿、分泌物增多,睫毛湿润、粘着等,组间无显著差异。野菊花水煎剂高剂量组给药1 d后上述炎症反应即明显减轻,给药5 d后受试动物结膜炎症反应基本消失,与模型组比较差异显著(P<0.01),其作用强度与阳性对照药珍珠明目滴眼液相近(P >0.05)。野菊花水煎剂低剂量组给药后上述炎症反应有所减轻,但与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。模型组在造模8d后仍有充血及水肿,评分结果为(3.78±1.18)。结果见表2。表2 野菊花水煎剂对家兔刺激性结膜炎治疗后不同时间评分(兔眼=12)(略)
3.2 野菊花水煎剂对家兔刺激性结膜炎的影响病理组织学检查结果各给药组动物眼结膜组织镜下观察扩张充血及水肿改变与模型组相比有不同程度的明显改善。野菊花水煎剂高剂量组、阳性对照药组水肿评分与模型组比较有极显著性差异(P<0.01),野菊花水煎剂低剂量组水肿评分与模型组比较亦有显著性差异(P<0.05)(表3,图1~5)。表3 野菊花水煎剂对家兔刺激性结膜炎影响的病理组织学评价(略)
4 讨论与结论
野菊花水煎剂高剂量组给药1 d后炎症明显减轻,给药5 d后受试动物结膜炎症基本消失,与模型组比较差异显著(P<0.01),其作用强度与阳性对照药珍珠明目滴眼液无显著性差异(P >0.05)。病理组织学检查:野菊花水煎剂高剂量组、阳性对照药组水肿评分与模型组比较有极显著性差异(P<0.01);低剂量组水肿评分与模型组比较亦有显著性差异(P<0.05)。野菊花水煎剂对急性刺激性结膜炎具有明显的治疗作用[7,8]。
野菊花具有清热解毒之功效,主要含黄酮类及有机酸类成分。我们曾对其中抗菌消炎药效组分进行了研究,并初步确定了野菊花中抗菌消炎的药效组分。本研究在以往研究基础上,为进一步确定野菊花治疗结膜炎的药效组分奠定了基础。
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