Paxillin在大鼠胰腺不同发育阶段的表达(2)

　　2.3成熟大鼠胰腺特异性基因及相关转录因子的表达胰岛素，胰多肽和淀粉酶等基因多从胚胎18.5 d开始出现明显高表达. 调节胰腺细胞分化的相关转录因子Pdx1，Nkx6.1和Pax4表达量从胚胎18.5 d开始下降（结果未显示）.
 
　　2.4pxn和actopaxin的RTPCRRTPCR结果显示，pxn和actopaxin在大鼠胰腺不同发育时期的差异表达：pxn在胚胎15.5 d表达量最高，随着胰腺发育表达量呈下降趋势；而actopaxin在胚胎18.5 d表达量最高，成年期表达量最低（图1）.

　　图1不同时期大鼠胰腺扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果　略
        
　　3讨论

　　以往对胰腺发育的研究多围绕调节细胞分化的相关因子，对于胚胎发育中后期生物学功能完善的具体机制研究较少.  我们应用芯片技术确立E12.5，E15.5，E18.5，新生和成年大鼠胰腺基因表达谱，以成年胰腺作为对照，全景式地展现在胰腺发育不同阶段基因的表达情况，为确保胰腺取材的准确可靠，应用RTPCR检测各时期样本胰岛素和胰高血糖素mRNA的表达［3-4］. 基因芯片结果提示在胚胎18.5 d之前以细胞分化为主，在胚胎18.5 d之后以典型结构形成和功能完善为主，这与胰腺在发育过程中的形态学改变及功能完善一致［5］.
 
　　pxn及其结合蛋白actopaxin［6］是整合素信号通路中的重要成员, 整合素信号通路在胚胎胰腺发育中调节胰岛细胞的黏附和迁移［7］. 到目前为止，围绕pxn和actopaxin的研究主要集中在肿瘤转移和损伤修复，胚胎发育也有涉及［8-9］，但多在胚胎整体发育中展开，没有具体到特定器官. 本研究首次在大鼠胰腺不同发育阶段检测pxn和actopaxin的表达，为研究pxn在胰腺发育中的作用提供线索.
　　
　　本研究我们应用基因芯片技术检测到在大鼠胰腺发育过程中，pxn表达高峰出现在胰岛形成的关键阶段，即胚胎15.5 d至胚胎18.5 d［5］，RTPCR的结果验证了pxn的表达. 这一现象提示具有调节细胞迁移黏附功能的pxn可能与胰岛形成有关. 从胚胎15.5 d到新生，胰腺完成胰岛结构形成、功能逐步完善以及出生后胰岛重塑［5］，actopaxin从胚胎15.5 d到新生的相对高表达提示其与胚胎发育后期胰岛形成和出生后的胰岛重塑相关. 基于pxn和actopaxin在细胞黏附与迁移中的重要作用，而典型胰岛结构形成与细胞黏附、聚集密切相关，pxn和actopaxin在胚胎胰腺发育中后期特异性高表达对胰岛形成的意义将是本课题组下一步研究的方向.
 
　　【参考文献】

　　［1］ Gu G, Wells JM, Dombkowski D, et al. Global expression analysis of gene regulatory pathways during endocrine pancreatic development［J］ .Development,2004,131（1）:165-179.

　　［2］ 刘长锁, 陈乃宏. 桩蛋白的结构与功能［J］. 生命的化学，2005，25（3）：208-211.

　　［3］ 倪雪峰，袁栎，程志祥，等. 巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表达变化［J］. 第四军医大学学报,2004,25(3):193-196.

　　［4］ 滕丽萍，胡静静，袁庆新，等.大鼠胚胎发育后期胰腺中Mesothelin的表达［J］.第四军医大学学报，2005,26(17):1570-1572.

　　［5］ Peters J, Jurgensen A , Kloppel G . Ontogeny, differentiation and growth of the endocrine pancreas［J］. Virchows Arch,2000,436(6):527-538.

　　［6］ Turner CE. Paxillin interactions［J］. J Cell Sci, 2000,113:4139-4140.

　　［7］ Cirulli V, Beattie GM, Klier G, et al. Expression and function of αVβ3 and αVβ5 integrins in the developing pancreas: Roles in the adhesion and migration of putative endocrine progenitor Cells［J］. J Cell Biol, 2000,150(6):1445-1460.

　　［8］ 张鑫，彭品贤，吕嘉春，等. Paxillin在肺癌组织中的表达研究［J］.广州医学院学报, 2004,32(2):4-7.

　　［9］ Hagel M, George EL, Kim A, et al. The adaptor protein paxillin is essential for normal development in the mouse and is a critical transducer of fibronectin signaling［J］. Mol Cell Biol, 2002, 22(3):901-915.

共2页: 上一页 [1] 2