作者：周玉宝 赵智凝 邵景元
【摘要】 目的: 研究免疫复合物（IC）在胆石症发生发展中的作用及意义. 方法: 胆石症患者101 (男39, 女62)例, 年龄(48.4±14.4)岁,手术切除胆囊组织切片IC免疫组化染色，术前和术后5 d测定循环免疫复合物（CIC）和Ig. 结石行IC免疫组化染色. 结果：与健康对照组比较, 胆结石患者术前血CIC增高（5.3±1.5 vs 1.2±0.8, P<0.01), IgG降低（8.7±2.0 vs 11.2±3.2, P<0.05),术后恢复正常；胆石中IC阳性率为82%（41/50），组织切片中IC阳性率90%（91/101）. 结论：胆石症患者血清中CIC和Ig有明显改变.
【关键词】 胆石症 免疫组化 免疫球蛋白 免疫复合物
0引言
胆石症是我国常见病［1］. 国内尸检报告胆石发生率为7%，随年龄增长发病率也增加. 近年来使用B型超声检查自然人群胆石发生率达10%左右. 在中年妇女胆石症的发病率高达15%. 且随着人民生活水平的提高其发生率还在不断上升. 研究表明，免疫复合物是胆色素结石形成的很重要因素之一［2］，我们对胆石症患者胆囊黏膜进行免疫复合物免疫组化检测及手术前后血清循环免疫复合物（CIC）和Ig含量检测以提示免疫复合物在胆石症发生发展中的作用及意义.
1对象和方法
1.1对象200511／200606我院外科因胆石症行胆囊切除手术患者101（男39，女62）例，年龄14~75（48.4±14.4）岁. 其中病理诊断胆囊炎伴胆石症98例，胆囊息肉伴结石1例,单纯胆囊息肉2例. 健康对照组：20(男8，女12)例来自门诊体检健康人群,年龄18~65(45.3±10.7)岁. 免疫球蛋白检测试剂购于温州伊利康生物技术有限公司. 葡萄球菌A蛋白辣根过氧化物酶由第四军医大学免疫教研室赠送. 底物液A邻苯二胺，B H2O2购于珠海亚利生物有限公司.
1.2方法选取50名患者，采集其手术前及手术后5 d血清并于手术中采用无菌方法收集结石标本. 血浆CIC测定采用聚乙二醇(PEG)沉淀比浊法，Ig测定采用免疫透射比浊法. 将结石标本用pH 7.4的PBS缓冲液洗涤后，压细，取适量放入10 mm×20 mm试管中，再加pH 7.4的PBS缓冲液离心洗2次，弃上清液，留沉渣，加葡萄球菌A蛋白辣根过氧化物酶0.2 mL，37℃水浴2 h，用pH 7.4的Tris2Tween20缓冲液离心洗涤3次，加底物A, B液混匀37℃水浴15 min，观察颜色的反应，反应体系呈深蓝色为阳性，否则为阴性. 采集全部101名患者胆囊组织，制作胆囊组织切片. 标本切片厚4 μm，石蜡切片常规脱蜡，置于pH 6.0的0.01 mmol/L枸橼酸钠溶液中5 min，3次，在20℃用含H2O2的甲醇溶液处理30 min. 每张切片滴加葡萄球菌A蛋白辣根过氧化物酶60 μL，稀释度为1∶50, 37℃孵育45 min，用pH 7.4的PBS缓冲液洗涤3次，加底物A,B液混匀，37℃孵育15 min，观察结果. 在组织切片中胆囊基底膜呈深蓝着色为阳性，否则为阴性.
统计学处理: 数据采用x±s表示, 用SPSS软件行统计分析，组内前后比较用配对t检验，组间比较用方差分析.
2结果
胆结石患者手术前后血中CIC和IgG有明显变化：与对照组比较，术前血CIC增高（P<0.01)；IgG降低（P<0.05)；而血中IgA和IgM无变化(表1). 术后恢复正常；50例结石中41例IC酶免疫组化染色阳性(图1). 在101例组织切片中91例胆囊黏膜基底膜IC阳性，10例为阴性(图2). 表1胆石症患者手术前后CIC, Ig的变化
低浓度α生育酚对神经元细胞膜的保护作用
JNK通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX2表达的影