【摘要】 血小板膜糖蛋白Ⅵ（ GPⅥ）是血小板表面重要的胶原受体，能介导血小板与胶原的初期黏附，产生信号转导，提高整合蛋白受体亲合力，引起血小板聚集和血栓形成。抑制GPⅥ功能可显著抑制胶原诱导的血小板黏附、聚集和血栓形成，故GPⅥ已成为研制新型抗血小板药物的主要靶点。过去几年中，对血小板和胶原相互作用的研究取得很大进展,本文就GPⅥ的结构，GPⅥ的功能，GPⅥ功能相关因素，GPⅥ与临床等作一综述。
【关键词】 血小板膜糖蛋白Ⅵ； 胶原； 血栓形成
Advances in the Studies of platelet glycoprotein Ⅵ（ GPⅥ）—— Review
Abstractplatelet glycoprotein Ⅵ（ GPⅥ） is a major receptor for collagen on the platelet surface. It mediates the initial platelet contact with collagen, generates intracellular signals, increases the affinity of integrin receptor, and causes platelet aggregation and thrombosis. Suppression of GPⅥ function can signicantly inhibit collagen-induced platelet adhesion, aggregation and thrombosis, so GPⅥ has become a novel target for antiplatelet therapy. Within the last few years, major advances have been made in understanding platelet-collagen interactions. In this paper, the advances of study on GPⅥ, including composition of GPⅥ, functions of GPⅥ, factors related with functions of GPⅥ, GPⅥ and clinic were summarized.
Key wordsGPⅥ; collagen; thrombosis
血小板与血管损伤部位暴露的细胞外基质（extra cellular matrix， ECM） 接触是形成血栓、修复损伤组织和止血的第一道防线。 在ECM的大分子组成成分中胶原起主要作用,它不但可以通过直接和间接的途径与血小板黏附，还可引起血小板聚集及促凝活性的表达,在存在高切应力的动脉或损伤血管处血小板与胶原的相互作用尤为重要。目前研究认为，血小板表面有两类胶原受体即整合蛋白α2β1(GPⅠa/Ⅱa)和血小板膜糖蛋白Ⅵ（GPⅥ）。α2β1可直接与胶原结合,但需要经过由内向外的信号转导转变为高亲和力状态才能实现，而GPⅥ在介导血小板与胶原黏附、快速信号转导、血小板活化及促凝活性表达等复杂过程中处中心位置［1］。近年来对GPⅥ的研究取得很大进展，现综述如下。
GPⅥ的结构
1982年, 应用2-D凝胶电泳，GPⅥ首次被确认。1999年，Clemetson等［2］首先报道人GPⅥ克隆为Ⅰ型单链跨膜糖蛋白,属免疫球蛋白超家族成员。GPⅥ基因定位于19号染色体长臂(19q13.4)，含有8个外显子，分子量为62 kD，其cDNA克隆全长1 017 bp,编码319个氨基酸残基和20个氨基酸信号肽，分子结构分为胞外区、跨膜区和胞内区。胞外区有2个免疫球蛋白样结构域和含多个O糖基化位点的黏蛋白样富含丝／苏氨酸区域，为分子的空间活动提供一定的柔韧度；位于GPⅥ跨膜区19个氨基酸中第3位带正电荷的精氨酸与免疫球蛋白Fc受体γ链跨膜区的天门冬氨酸残基以盐键相连，组成受体复合物；胞内区含51个氨基酸，不含酪氨酸残基，但含有2个独特序列，一是靠近跨膜区富含碱性氨基酸的区域，能与钙调蛋白结合；另一个是位于中部的富含脯氨酸基序，可选择性与Src家族酪氨酸激酶Fyn 和Lyn 的SH3区结合［3］。
GPⅥ的功能
GPⅥ介导血小板与胶原的初期黏附，产生信号转导，提高整合蛋白受体亲合力，引起血小板聚集、释放和血栓形成［4］。
胶原、合成胶原及GPⅥ特异性配体
在人类基因组上，有20余种胶原基因，其中9种被证实表达于血管壁上，纤维胶原Ⅰ、Ⅲ型是血管壁ECM的重要组成成分，而Ⅳ型网状胶原是内皮细胞基底膜的组成形式。血小板可被不溶性纤维胶原激活，可溶性胶原不结合静止状态的血小板，而与另一胶原受体，活化的整合蛋白α2β1结合，它只有转变为纤维胶原时才能激活血小板［5］。胶原含有重复的GPO基序（G，甘氨酸；P，脯氨酸；O，羟脯氨酸），约占Ⅰ、Ⅲ型胶原的10％，是血小板与ECM接触的重要结构形式，也是与GPⅥ免疫球蛋白样结构域的结合基序。胶原相关肽（collagen-related peptide， CRP）是含有串联的GPO基序的人工合成肽段，是GPⅥ的诱导剂。许多蛇毒肽可通过GPⅥ发挥作用，其中C型凝集素convulxin是最早被证实的，它通过使受体丛集诱导血小板活化。
GPⅥ与免疫球蛋白Fc受体γ链复合物
Jarvis等［6］发现，缺乏FcRγ链的血小板对胶原的刺激无反应，提示GPⅥ和FcRγ链以非共价键结合的蛋白复合物是所有类型胶原的关键受体，两者在结构和功能上密切相关。Yoshiki等［7］ 也实验证实，GPⅥ只有和FcRγ链组成异源二聚体，才能与胶原结合，而且只结合不溶性纤维胶原。FcRγ链含有免疫受体酪氨酸活化基序（immuno receptor tyrosine based activation motif， ITAM），是该复合物的信号转导部分。
GPⅥ与信号转导
胶原通过其特异性GPO序列与GPⅥ／FcRγ链受体复合物结合后，使2个GPⅥ复合物交联而活化。GPⅥ胞内富含脯氨酸的基序选择性与Src家族酪氨酸激酶Fyn 和Lyn 的SH3区结合，使FcRγ链的ITAM磷酸化，ITAM磷酸化为Syk家族酪氨酸激酶提供了结合位点，可特异结合在其串联的SH2区而使Syk酪氨酸磷酸化。拥有多个磷酸化位点的Syk底物，接头蛋白LAT和SLP-76等可募集其他信号转导复合体，引发下游许多效应酶包括磷脂酰C－γ2, 小G蛋白和磷脂酰肌醇3激酶等活化，从而使信号转导级联扩大，导致胞内钙离子浓度升高，纤维蛋白原受体活化，细胞骨架重排，最终血小板发生聚集、释放和促凝活性表达。GPⅥ在体内分布有明显的空间限制性,仅分布于巨核细胞和血小板,在其他组织细胞未见表达,被认为是血小板胶原特异的信号转导蛋白。GPⅥ基因剔除小鼠血小板表现出对胶原刺激无反应，但无明显出血倾向［8］。
GPⅥ功能相关的影响因素
整合蛋白α2β1的作用
整合蛋白α2β1（也被称作为GPⅠa/Ⅱa或淋巴细胞VLA-2）是血小板上第一个被确认的胶原受体，依赖于Mg2+与胶原结合，但不能诱导酪氨酸激酶活化。GFOGER序列是α2β1特异性螺旋肽，支持α2β1介导的黏附［9］。α2β1在体内多种组织上表达，是胶原和层黏连蛋白的受体，但在血小板上只和胶原结合。上个世纪80年代后期及90年代早期，α2β1被认为是血小板表面最主要的胶原受体，在血小板与胶原的黏附、活化中起关键作用，但后来对α2β1作用的研究出现争议。Jung和 Moroi［10］的研究认为，整合蛋白与胶原的亲合力受细胞内信号的调整，即GPⅥ介导与胶原最初的结合，导致整合蛋白α2β1和αⅡbβ3的活化，反过来它们又介导了与胶原的稳定结合并加强了GPⅥ的信号转导。但另有研究证实α2β1在血小板与胶原的最初黏附中起着重要作用［11］。Auger等［12］应用特异性抗α2β1和GPⅥ抗体以及Src家族酪氨酸激酶抑制剂研究发现，α2β1和GPⅥ是通过不同途径介导血小板与胶原的结合，提示这两种胶原受体可能相互协作增加血小板与胶原的结合而刺激血小板活化。最近，Sarratt等［13］应用药理学和基因学方法研究证实，α2β1和GPⅥ这两个结构各异的胶原受体在血小板与胶原的结合中发挥同等重要的作用，都能产生细胞内信号转导，导致血小板聚集，并且两者有密切的合作关系。
GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ复合体的作用
内皮下胶原最初俘获血小板需要血浆蛋白vWF，它能同时结合胶原和GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ。vWF依赖的胶原结合作用可快速终止，使血小板仅在vWF表面滚动但不能形成稳定的血栓，这种结合能被胶原和胶原受体更稳定的结合而取代。vWF和GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ结合后刺激钙的动员和细胞骨架重排，上调αⅡbβ3亲合力，使其与VWF结合，增加黏附，结合纤维蛋白原而形成血栓。vWF和GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ结合后也可刺激血小板信号转导，引起血小板颗粒释放，上调整合蛋白亲合力，其具体途径可能类似于GPⅥ在血小板内的信号转导。GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ和GPⅥ两者的关系一般认为，在低切应力状态下，GPⅥ启动血小板聚集，而GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ复合物则引发高切应力条件下的血小板聚集。但最近对GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ及GPⅥ功能和信号转导的研究显示两者有许多共同特征，从而推测它们在细胞表面可能相互关联［14］。Arthur等［15］最近也研究发现，应用GPⅠb特异性单克隆抗体SZ2，可明显阻断GPⅥ特异性诱聚剂CRP所诱导的血小板聚集，并证实在静止和活化的血小板表面，GPⅥ和GPⅠb-Ⅴ－Ⅸ复合物均存在相互作用。
αⅡbβ3（GPⅡb/Ⅲa）的作用
αⅡbβ3作为纤维蛋白原受体是血小板血栓形成的最后步骤。当血管壁受损暴露血管内皮下基质,血小板通过GPⅠb及GPⅥ介导黏附于内皮下胶原组织,黏附的血小板随后发生一系列反应,包括花生四烯酸代谢,产生血栓烷A2和释放细胞颗粒内容物ADP等,导致αⅡbβ3复合物构型改变和纤维蛋白原受体的暴露,并通过与纤维蛋白原的结合而使血小板之间相互黏附、聚集成团,在血管破损处形成血栓。αⅡbβ3由内向外的活化依赖于钙离子而αⅡbβ3与配体结合后还会产生由外向内的信号传递引起血小板的第二次活化反应，促进颗粒释放，以正反馈增强活化过程；同时，血小板膜磷脂的翻转促进了血液的凝固过程［16］。
SDF-1/CXCR4与血液系统恶性肿瘤的关系研究进展
血小板和组织因子