3 讨论
鼻咽癌的治疗目前仍以放射治疗为主,早期鼻咽癌通过放射治疗可以取得良好的疗效，但Ⅲ、Ⅳ期单独放射治疗的疗效仍较差，其五年存活率仅为30%～55%[3]。局部复发与远处转移是治疗失败的主要原因，因此探讨放化疗合理的联合应用以提高NPC治愈率是目前研究的重点之一。
吉西他滨是一种新的脱氧胞苷类似物，在体内及体外实验中已进行了对非小细胞肺癌、胰腺癌及头颈部肿瘤的放射增敏性研究，取得了很好的疗效[2,4,5]。其放射增敏的作用机制为[6]：使细胞周期重分布，周期敏感细胞增加；直接渗入细胞DNA，抑制其修复；使细胞dATP池耗竭，影响细胞DNA生物合成，导致细胞凋亡。紫杉醇是一种新型抗微管药物。国外研究表明紫杉醇对卵巢癌、乳腺癌[7]及头颈部肿、非小细胞肺癌 [1,8]等多种实体瘤细胞有放射增敏作用。但其确切作用机制仍不十分清楚。其中一个可能的机制是其通过抑制微管蛋白解聚使细胞阻滞于M期，因而也就提高了细胞的放射敏感性[7] 。
本实验研究显示，吉西他滨对细胞周期的影响是将其阻滞于S期，而紫杉醇则是将其阻滞于G2＋M期，与文献报道相似[9,10]。同时研究还发现，两药协同作用后G2＋M期细胞比例有所下降，S期细胞比例增加，表现为吉西他滨部分逆转了紫杉醇所致的G2＋M期阻滞，但两药协同使HNE2细胞的总细胞周期进展得到显著阻滞，明显增强了它们抑制肿瘤细胞生长和诱导凋亡的作用，大大提高了其对肿瘤细胞的放射增敏作用。因此通过本实验证实了吉西他滨和紫杉醇协同作用使其同时从两个不同途径共同作用，诱导了鼻咽癌HNE2细胞的凋亡，显著提高了细胞的放射敏感性。
细胞中bax与bcl2蛋白的比例似乎可调控凋亡的发生[11]。研究发现在抗肿瘤药物诱导的细胞毒性中，凋亡是一个非常重要的现象。抗肿瘤药物诱导凋亡的分子机制是通过死亡受体依赖性和非依赖性通道介导的，与线粒体内膜上的电压依赖性阴离子通道释放的细胞色素C密切相关的，而细胞色素C的释放是通过包括Bid、bax和Bak在内的促凋亡蛋白和包括bcl2 和bclX(L)在内的抗凋亡蛋白的相互作用来调控的[12]。本研究显示吉西他滨或紫杉醇与辐射联用均可使bcl2的表达下降，而使bax的表达上升，两药协同作用联合辐射后可进一步使bcl2的表达下降，而使bax的表达上升，说明两者协同作用并联合辐射后可进一步促进肿瘤细胞凋亡，提示两者协同显著增强鼻咽癌HNE2细胞的放射敏感性的机制可能与促进细胞凋亡及调控bax/bcl2的表达有关。
总之，本实验证明抗肿瘤新药吉西他滨与紫杉醇协同作用可以促进鼻咽癌HNE2细胞凋亡，抑制其细胞周期的进展，下调bcl2的表达并上调bax的表达，显著增强鼻咽癌HNE2细胞对射线的敏感性，从而为临床上同时利用两药协同射线治疗鼻咽癌提供了重要的实验依据。
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