【摘要】 目的 探讨鼻咽低分化鳞状细胞癌组织中EB病毒潜伏膜蛋白LMP1和survivin表达水平与预后的关系。方法 用免疫组化SP法对83例鼻咽低分化鳞状细胞癌组织进行LMP1和survivin标记，分析其与临床分期、放疗后三年内结果的关系。结果 LMP1的表达与临床分期无关（P＞0.05），但与放疗后三年内复发有关（P＜0.05）。survivin与临床分期，放疗后三年内复发有关（P＜0.05）。LMP1与survivin有相关（P＜0.05）。结论 LMP1与survivin在鼻咽癌的预后中有重要价值，可作临床治疗的参考指标。
【关键词】 鼻咽癌 LMP1;survivin 免疫组化
Expressions of EpsteinBarr Virus Latent Membrane Protein 1(LMP1) and survivin in Nasopharyngeal Carcinoma and their Clinical Significance
Key words：Nasopharyngeal;Carcinoma;LMP1;survivin;Immunohistochemical method
鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma，NPC）是我国常见的恶性肿瘤，尤以两广地区高发，随着对NPC研究的逐渐深入，EBV感染和人的NPC密切相关已得到公认。survivin是一种凋亡抑制因子，有研究表明survivin的表达程度与病期进展和肿瘤组织的恶性程度相一致。我们采用免疫组化的方法检测NPC中最常见的低分化鳞癌病理组织中LMP1和survivin的表达情况，结合临床分期、放疗后三年内是否复发等资料进行研究，以探讨两者在NPC中的作用、相互关系及其意义。
1材料和方法
1.1材料
83例鼻咽低分化鳞癌标本均来自我院1998年1月～2002年1月收验的石蜡包埋组织。
1.2分组
NPC的临床分期按1992年福州全国鼻咽癌会议推荐标准[1]，将Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ期26例，Ⅳ期29例分为3组；按放疗三年内是否复发将病例分为未复发组48例和复发组35例两组。
1.3免疫组化检测方法
采用过氧化物酶标记的链霉卵白素染色法SP法。使用抗体均购于美国Santa Cruz公司产品，使用抗体的工作浓度：鼠抗人单克隆抗体LMP1 1:80，兔抗人多克隆抗体survivin 1∶100，SP试剂盒购于北京中山公司，整个过程按试剂盒说明书进行。用磷酸盐缓冲液（phosphatic buffered saline，PBS）代替一抗作阴性对照。
1.4判断标准
LMP1以癌细胞胞浆、胞膜呈黄棕色颗粒，survivin以癌细胞胞核和胞浆呈黄棕色颗粒,阳性细胞数＞5%为阳性标记。
1.5统计学处理
采用SPSS11.5软件，χ2检验。PEMS3.0软件，相关分析。P＜0.05有显著性差异。
2结果
2.1LMP1和survivin在鼻咽低分化鳞癌不同临床分期组别中的表达
（1）LMP1在Ⅰ～Ⅱ期病例组28例中阴性表达见图1，阳性表达见图2，阳性率高于Ⅲ期病例组，低于Ⅳ期病例组。但LMP1在不同分期中的阳性率比较无明显差异。（2）survivin在Ⅰ～Ⅱ期病例组28例中阴性表达见图3，阳性表达见图4，阳性率低于Ⅲ期病例组和Ⅳ期病例组，Ⅰ～Ⅱ期组阳性率与Ⅲ期组、Ⅳ期组阳性率比较有统计学意义，Ⅲ期、Ⅳ期组阳性率比较无明显差异，见表1。表1 LMP1、survivin表达与NPC低分化鳞癌临床分期的关系注：LMP1在Ⅰ～Ⅱ期组的阳性率与Ⅲ期组阳性率的比较：χ2=0.0593，P=0.08075；Ⅰ～Ⅱ期组的阳性率与Ⅳ期组阳性率的比较：χ2=0.0128，P=0.9101；Ⅲ期组阳性率与Ⅳ期组的比较：χ2=0.1271，P=0.7215。survivin在Ⅰ～Ⅱ期组的阳性率与Ⅲ期组阳性率的比较：χ2=6.4803，P=0.0109；Ⅰ～Ⅱ期组的阳性率与Ⅳ期组阳性率的比较：χ2=7.9875，P=0.0047；Ⅲ期组阳性率与Ⅳ期组的比较：χ2=0.0458，P=0.83052.2LMP1在放疗后三年未复发的病例组中的阳性率低于放疗后三年内复发病例组，两者比较有统计学意义。survivin在放疗后三年未复发的病例中的阳性率低于放疗后三年内复发的病例组，两者比较有统计学意义，见表2。表2LMP1、survivin表达与放疗后三年有无复发的关系 注：LMP1在放疗后三年无复发组的阳性率与放疗后三年内复发组阳性率的比较：χ2=5.3989，P=0.0201。survivin在放疗后三年无复发组的阳性率与放疗后三年内复发组阳性率的比较：χ2=7.4532，P=0.0063。2.3LMP1与survivin在鼻咽低分化鳞癌中表达的关系见表3，两因素之间统计学处理有明显相关性。表3LMP1表达与survivin表达注：LMP1与Survivin两因素之间相关性分析：r=0.4960，P=0.0000
3讨论
细胞凋亡一直是肿瘤研究中的热点问题，它在肿瘤的发生、发展、治疗等方面都发挥着重要作用。LMP1是EB病毒潜伏感染时表达的一种重要转化膜蛋白，被确认为具有癌基因功能的蛋白质。Kawanish[2]、Komano[3]、Souza[4]等研究发现LMP1可以抑制H1299上皮、B细胞、Burkitt’s淋巴瘤细胞和Jurkat细胞等凋亡。survivin是1997年发现的一个凋亡抑制因子，属于凋亡抑制蛋白家族（IAPs），因其在胚胎组织和大多数肿瘤组织中呈高表达，而正常组织和癌旁组织不表达，故受到关注[5,6]。
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