2.4 食管鳞癌患者生存分析 将60例食管鳞癌患者中，单因素分析pRb2/p130、cyclinD1和MUC1对生存率的影响通过KaplanMeier法绘制生存曲线，Logrank检验显示，pRb2/p130阳性高表达组的累积生存率明显高于阴性低表达组（P=0.0032），见图1，cyclinD1和MUC1的阳性表达组与阴性表达组的累积生存率无统计学意义(P>0.05)。多因素Cox比例风险回归模型对患者年龄、性别、分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度以及pRb2/p130、cyclin D1和MUC1的表达等可能与预后有关的指标进行分析，见表3。在α＝0.05的水平上逐步筛选，淋巴结转移、癌组织分化程度、pRb2/p130表达三个因素被筛入Cox模型内，其中淋巴结转移对预后的影响最大(风险度6.521，P＝0.001)。表3 Cox比例风险模型多因素分析
3 讨论
pRb2/p130是Rb2/p130抑癌基因的表达蛋白，其与pRb、p107三者共同组成了视网膜母细胞瘤家族(Rb家族)蛋白。三种蛋白的结构和功能相似作用相互补充，在细胞周期的进行中，通过对转录因子E2F家族成员活性的调节，在细胞周期的不同阶段发挥负调控功能，将正在分裂的细胞阻滞于G1期［1］。pRb2/p130通常与转录因子E2F家族成员结合，阻止后者的转录活性。在G1期，活化的Cdk4通过对pRb2/p130的磷酸化，使pRb2/p130与E2F解离，受E2F抑制的基因开始转录、表达。pRb2/p130功能的丧失使E2F的转录活性失控，为正常细胞的癌变及肿瘤细胞的失控增殖创造了条件。Nozoe等［2］研究表明，pRb2/p130在食管鳞癌中的表达明显低于正常组织，且与癌组织的分化程度相关，癌组织的分化程度越低，其表达也越低，患者的生存率也越低。郑素勤等［3］通过对101例肺癌组织的研究也表明，随癌组织分化程度由高到低，TNM分期的增加，pRb2/p130的表达也逐级降低。pRb2/p130作为核内蛋白，理应核内表达，但本实验结果有核内、胞浆、核浆三种表达形式。这与郑素勤等［3］实验结果一致，可能包含这些原因：(1)Rb2/p130基因突变；(2)石蜡标本的保存和处理不当,造成胞核超微结构的损伤,引起pRb2/p130异位表达。我们通过对60例食管鳞癌组织和16例正常食管组织的研究也表明，pRb2/p130在癌组织中的表达明显低于其在正常组织中的表达；且随癌组织由高分化到低分化，TNM分期的增加，淋巴结转移和浸润加深，pRb2/p130的表达在逐步降低。用KaplanMeier法和Logrank检验分析，pRb2/p130在癌组织中阳性表达的患者生存率明显高于其阴性表达的患者；Cox比例风险模型分析示pRb2/p130的表达水平是危险因子，可作为食管鳞癌患者的预后指标。
cyclin D1与Cdks家族成员结合成cyclin D1/Cdks复合物通过磷酸化视网膜母细胞瘤家族（Rb家族）蛋白而释放E2F因子，游离的E2F与特殊基因启动子区结合，这些基因开始转录和表达，促进细胞完成G1期到S期的转变。cyclin D1的过表达使细胞G1期明显缩短，细胞增殖加速，最终导致癌变的发生。Wu等［4］通过对70例食管鳞癌的研究表明，cyclin D1在癌组织中有过表达，且随癌组织由高分化到低分化其表达在明显增强。Itami等［5］对156例食管鳞癌的研究结果显示，cyclin D1在低分化鳞癌中的表达远高与在高分化鳞癌中的表达。本研究结果为，cyclin D1的表达在核内，且虽随癌组织由高分化到低分化、淋巴结转移表达的百分率在增高，差异有统计学意义(P＜0.05)；cyclin D1异常表达是食管癌发生中的早期事件。
MUC1(粘蛋白1)是一种Ⅰ型跨膜糖蛋白，可使E2钙粘蛋白下调表达,E2钙粘蛋白的下调表达促进了肿瘤细胞的侵袭与转移［6］。MUC1通过在细胞表面的过度表达减小细胞与细胞、细胞与细外基质间的粘附使肿瘤细胞易于从原发位脱离［7］。Suwa等［8］证明当肿瘤细胞转染MUC1基因后,肿瘤细胞获得了更高的移动性和侵袭性。王恕怀等［9］对60例胃癌的研究证明MUC1的表达与淋巴结转移、癌组织进展呈正相关，庄则豪等［10］通过对50例食管鳞癌的研究也发现MUC1的表达与淋巴结转移及癌组织进展密切相关。本研究发现,MUC1免疫反应程度随淋巴结转移呈增强趋势,即无淋巴结转移组原发灶的MUC1免疫反应强度较淋巴结转移组低,提示MUC1的表达程度与肿瘤细胞的转移密切相关。
【参考文献】
［1］ Classon M,Dyson N. p107 and p130: versatile proteins with interesting pockets［J］. Exp Cell Res, 2001,264(4)：135147.
［2］ Nozoe T, Korenaga D, Itoh S,et al.Clinicopatholoical significance of pRb2/p130 expression in squamous cell carcinoma of the esophagus［J］. J Cancer Res Clin Oncol,2002,10:10071008.
［3］ 郑素勤,王利民,孙瑞军,等. 人体肺癌组织内pRb2/p130的表达及意义［J］. 中国综合临床,2002,18(9):827828.
［4］ MingYao Wu, ChuXiang Zhuang, HuanXing Yang, et al.Expression of Egr1,cfos and cyclinD1 in esophageal cancer and its precursors: an immunohistochemical and in situ hybridization study［J］. World J Gastroenterol,2005,10(4): 476480.
［5］ Itami A, Shimada Y, Watanabe G, et al. Prognostic value of p27(Kip1) and cyclinD1 expression in esophageal cancer［J］.Oncology,1999,57(4):311317.
［6］ Hirasawa Y,Kohno N ,Yokoyama A ,et al . Natural antoantibody to MUC1 is a prognostic indicator for non2small cell lung cancer［J］. Am J Respir Crit Care Med,2000,161(2 Pt l):589594.
［7］ 张立新,李春海. MUC1粘蛋白的免疫生物学作用及其在肿瘤生物治疗中的应用［J］.中国肿瘤生物治疗杂志,2000,7(3):165170.
［8］ Suwa T , Hinoda Y, Mskiguchi Y, et al.Increased invasiveness of MUC1cDNA2 transfected human gastric cancer MKN74 cells［J］. Int J Cancer, 1998,76(3):377382.
［9］ 王恕怀,邹天彪,程慧,等. MUC1 粘蛋白在进展期胃癌中的表达及临床意义［J］. 哈尔滨医科大学学报,2003,3(37):251253.
［10］庄则豪,王立东,高珊珊,等. 河南食管癌高发区食管和贲门癌组织中粘蛋白1 的表达［J］. 郑州大学学报(医学版),2002,6（37）:774777.
乳腺癌组织中骨桥蛋白和骨连接蛋白的表达及其临床病理意
血管内皮生长因子受体3对宫颈癌细胞凋亡的效应研究