【摘要】 目的 探讨survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达，及其与p53、bcl2蛋白表达的相互关系。方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白—过氧化酶连接法（SP法），检测survivin、p53、bcl2基因在76例NSCLC肿瘤组织及survivin基因在30例病灶旁正常肺组织中的表达。结果 survivin基因在正常肺组织中不表达，76例肺癌组织中46例表达阳性，占60.5%。survivin基因表达与肺癌患者的年龄、性别、吸烟、病理类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期无明显相关关系。肺癌组织中p53蛋白表达阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为71.7%（33/46）、43.3%（13/30），两者比较，差异有显著性（P<0.05）；bcl2蛋白表达阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为94.7%（36/38）、26.3%（10/38），两者比较，差异有极显著性（P<0.01）。结论 survivin基因在肺癌组织中的异常表达，对NSCLC的发生发展起重要作用。survivin基因表达与肺癌组织中p53、bcl2蛋白的异常表达密切相关。survivin基因可能成为NSCLC新的诊断标志及基因治疗的新靶点。
【关键词】 survivin p53 bcl2 肺癌
0 引言
凋亡调节紊乱有助于细胞的恶性转化和肿瘤的进展。研究凋亡的调节机制对于弄清肿瘤包括肺癌的发病机制及提供新的肿瘤防治措施具有重要的意义。survivin是新近发现的一种凋亡抑制蛋白，其组织分布具有明显的细胞选择性，与另一凋亡抑制基因bcl2的分布显著不同，在正常成人已分化的组织（胸腺、生殖腺除外）不表达而在多种肿瘤组织中表达，且survivin的表达与患者的预后密切相关[13]。我们采用免疫组织化学方法检测了76例肺癌组织和30例病灶旁正常肺组织中survivin蛋白表达，探讨其与临床病理特征及p53、bcl2表达的相互关系。
1 资料与方法
1.1 资料来源
我院胸外科2001年12月～2002年4月肺癌手术患者76例，其中男48例，女28例，年龄37～76岁，中位年龄58±10岁，肺癌组织76例，病灶旁正常肺组织30例。依据UICC 1997年新的修订标准进行TNM分期[4]，其中Ⅰ期48例，Ⅱ期6例，Ⅲ期16例，Ⅳ期6例。按病理形态学分为：鳞状细胞癌30例，腺癌38例，大细胞癌8例。按分化程度分为：高、中分化癌18例，低分化、未分化癌58例。所有患者均为原发性肺癌，术前均未接受过化疗或放疗等任何治疗。标本经10%中性福尔马林固定，常规脱水包埋，制成4μm厚连续石蜡切片。采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接（SP）免疫组织化学方法，一抗survivin为鼠抗人单克隆抗体（Neomarkers公司，美国），工作浓度为1∶30；一抗p53、bcl2为鼠抗人单克隆即用型抗体（Santa cruz公司，美国）；SP试剂盒为福州迈新公司产品。染色步骤按产品说明书进行。DAB显色。选用已知阳性胃癌切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。
1.2 结果判定
光学显微镜下观察，胞核或胞浆染为淡黄至棕黄色者为阳性细胞。凡显色强度与背景无明显差别者为阴性。
1.3 统计学处理
数据用阳性率（%）表示，显著性用χ2检验，用SPSS10.0软件完成。
2 结果
2.1 肺癌和病灶旁正常肺组织survivin基因的表达
survivin基因表达阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆中，为粗细不一的棕黄色颗粒，见图1、2。正常肺组织中未见survivin基因表达，而76例肺癌组织中46例survivin基因表达阳性，占60.5%。
2.2 肺癌组织survivin基因表达与临床病理特征的关系
survivin基因表达与肺癌患者的年龄、性别、吸烟、病理类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系，见表1。
2.3 肺癌组织survivin基因表达与p53、bcl2基因表达的相关性
p53蛋白阳性产物积聚在肿瘤细胞核中，见图3。肺癌组织中survivin基因表达与p53蛋白表达密切相关，p53蛋白阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为71.7%（33/46）、43.3%（13/30），两者比较，差异有显著性（P<0.05）。bcl2蛋白阳性产物主要定位于细胞浆中，见图4。肺癌组织中survivin基因表达与bcl2蛋白表达密切相关，bcl2蛋白表达阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为94.7%（36/38）、26.3%（10/38），两者比较，差异有极显著性（P<0.01），见表1。表1 survivin基因的表达与肺癌临床病理
DPC4基因在肺癌中的表达及其与微血管形成和凋亡的关系
CD44v6和MRP在卵巢癌中的表达