作者：谭文福 吴绪峰 陈惠祯
【摘要】 目的 探讨CD44v6和 MRP在上皮性卵巢癌组织中表达与化疗疗效和预后的关系。方法 采用免疫组织化学SP法,检测10例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤和50例卵巢恶性肿瘤上皮性组织中CD44v6和 MRP的表达。结果 ①CD44v6和MRP在卵巢恶性肿瘤中的表达明显高于在良性及正常组织中的表达（P<0.05）； ②CD44v6和MRP强阳性率与卵巢癌的临床分期、组织学分级和淋巴结转移有关(P<0.05)； ③卵巢癌中CD44v6和MRP的表达呈正相关（r=0.557, P<0.05）； ④CD44v6和MRP阳性表达的病例，化疗疗效和预后差。 结论 检测卵巢癌中的CD44v6和MRP表达可反映肿瘤细胞的化疗疗效及预测预后。
【关键词】 卵巢肿瘤 免疫组化 CD44v6 MRP
0 引言
卵巢癌是女性生殖系统第二大常见恶性肿瘤，由于肿瘤细胞转移和化疗耐药，致使治疗困难，患者预后差。本实验旨在联合检测卵巢癌组织中CD44v6和MRP的表达，分析其相关性，从而为预测卵巢癌化疗疗效和预后、指导治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 标本来源
10例正常卵巢、20例良性肿瘤和50例上皮性卵巢癌组织,标本来自武汉大学中南医院妇瘤科，1999年4月～2004年10月手术标本经病理证实的病例。标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋。年龄36～76岁,平均58.25岁。50例上皮性卵巢癌组织中浆液性囊腺癌36例，黏液性囊腺癌4例，子宫内膜样癌6例，透明细胞癌4例；术前均未行化疗和放疗,术后经病理证实的高分化18例,中分化18例,低分化14例；临床分期（FIGO）I～II期14例，III期34例和IV期2例；有淋巴结转移者28例,无淋巴结转移者22例。
1.2 方法
采用免疫组织化学SP法, 4μm厚连续切片，切片常规脱蜡水化后,用3%过氧化氢去除内源性过氧化物酶, 微波抗原修复,余步骤按试剂盒说明书进行。MRP和CD44v6单克隆抗体（一抗为鼠抗人）和SP试剂盒,均购自北京中山生物技术有限公司。用已知阳性切片做阳性对照,用PBS代替一抗做阴性对照。用HIPAS-1000高清晰度彩色病理图像免疫组化测量系统进行图像分析。
1.3 结果判断
CD44v6和MRP以细胞膜和/或细胞浆呈棕黄色为阳性细胞，否则为阴性。细胞着色强度判断：①CD44v6［1］，(-)为阴性；(+)为≤20%；(++)为21%～50%；(+++)为>50%。②MRP［2］,(-)为阴性；(+)为≤25%；(++)为26%～50%； (+++)为>50%。(++)以上为强阳性。
1.4 统计学处理
采用统计软件SPSS11.5进行统计学分析。采用卡方检验和精确概率法（以P<0.05为有统计学意义），指标间进行Spearman相关分析。用COX回归模型评价蛋白表达与卵巢癌预后因素的关系。
2 结果
2.1 CD44v6和MRP的表达
CD44v6在卵巢正常组织、良性肿瘤和恶性肿瘤组织中的阳性表达率分别为0%、10.0%和68.0%；MRP分别为10.0%、15.0%和64.0%。CD44v6和MRP在卵巢恶性肿瘤中阳性表达率，显著高于卵巢正常组织和良性肿瘤组织 (P<0.05)。卵巢浆液性、非浆液性囊腺癌中，CD44v6表达分别为72.2%和57.1%，MRP分别为66.7%和57.1%，差异均无显著性（P>0.05）。
2.2 CD44v6和MRP与临床病理参数的关系
CD44v6和MRP蛋白的表达与临床分期（FIGO）、组织学分级和淋巴结转移无关(P>0.05)。但它们在卵巢恶性肿瘤的表达强度(强阳性率)均为32.0%（16/50），两者都与卵巢癌的上述病理参数有关(P<0.05)。28例淋巴结转移阳性病例中，淋巴结转移阳性率随着临床分期、组织学分级的升高而增加，且III期与IV期比较差异有显著性(P<0.05)，而组织学分级组间比较差异无显著性(P>0.05)，见表1。 表1 CD44v6和MRP表达强度与临床分期（FIGO）、组织学分级和淋巴转移的关系
2.3 CD44V6和MRP表达的相关性
50例卵巢癌中MRP与CD44v6表达， 经Spearman相关分析， 结果显示： r=0.557， P<0.05， 表明MRP与CD44v6表达呈正相关， 见表2。表2 MRP与CD44v6在卵巢癌中表达的相关性
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