作者：姜艳娥,李奇志,毛永荣
【摘要】 目的 研究p65和VEGF在牙龈癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测46例牙龈鳞癌组织中p65和VEGF的表达，并与临床病理指标结合进行分析。结果 牙龈鳞癌组织中p65与VEGF阳性率分别为63.04%与56.52%。p65的表达与牙龈鳞癌的病理分级、淋巴结转移无相关性，与临床分期明显相关(P＜0.05）。VEGF的表达与牙龈鳞癌的病理分级、淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。p65与VEGF在牙龈鳞癌的表达呈正相关。结论 p65和VEGF参与牙龈鳞癌的发生发展过程，可作为评估牙龈鳞癌生物学行为的一项指标，用于识别高危转移和不良预后者。
【关键词】 牙龈癌;免疫组织化学;p65;VEGF
NFκB (p65)是具有多向性转录调节作用的序列特异性DNA结合蛋白,调控多种基因的表达,参与细胞增殖、凋亡及细胞因子的产生,在肿瘤的发生发展中起重要作用。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)是从粘液细胞或神经母细胞瘤中提取的较强的血管生成因子，能特异性地结合血管内皮细胞，促进内皮细胞生长，增强血管通透性，从而协助肿瘤细胞进入脉管系统，加速肿瘤的扩散与转移，影响患者的预后，本实验拟探讨牙龈癌组织中p65和VEGF的表达及其相互关系。
1 资料和方法
1.1 病例选择
所有检测标本为湖北省肿瘤医院1995年1月～2005年11月间牙龈癌手术后病人的病理存档蜡块，筛选病例，要求所有患者术前未接受放疗或化疗。共收集46例标本，其中男性19例，女性27例，年龄29～71岁，平均年龄52.36岁。病理分级,其中高分化24例，中分化22例。切片后HE染色，并经病理科医师重新阅片后确诊。8例正常口腔粘膜的石蜡标本作为对照，对照标本来自湖北省肿瘤医院切除舌下腺和舌部良性肿块时切取的周围正常口腔粘膜。
1.2 试剂和方法
p65和VEGF单克隆抗体及SP试剂均购于福州迈新生物技术开发公司。石蜡包埋标本制成4～5μm的连续切片，脱蜡，脱水，采用SP染色（按照说明书进行操作），分别对p65和VEGF进行染色。用已知阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
p65的阳性表达为细胞浆及部分细胞核出现棕黄色颗粒，VEGF的阳性表达为细胞浆出现棕黄色颗粒。高倍镜下取5个不同视野，各计数200个细胞，按阳性细胞所占的百分率分为阴性 ～阳性。阳性细胞＜10%为阴性，阳性细胞≥10%为阳性。实验时，均设立阳性及阴性对照。
1.4 统计学处理
所有数据在SPSS 11.0 for WINDOWS统计软件下进行分析。统计学方法采用χ2检验和相关分析。
2 结果
2.1 p65和VEGF蛋白在牙龈癌组织中的表达 牙龈癌组织中p65蛋白呈阳性表达者29例，阳性率为63.04%，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。VEGF蛋白呈阳性表达者26例，阳性率为56.52%，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。表1 p65和VEGF在实验组和对照组中的表达
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