HPLC法测定注射用肌苷的含量(1)

    【关键词】  注射用肌苷；高效液相色谱法；含量测定

     【Abstract】  Objective  A high-performance liquid chromatography (HPLC) was established for the determination of inosine contents in injection.  Methods  Impurity in the inosine injection could be separated on Kromasil C18 colnmn (5μm 4.6mm×250mm) using methanol-water (10:90) as mobile phase and UV detector at 248nm.  Results  The linear range was 4.23～63.48μg/ml(r=0.9999).Average recovery in the lower,moderate and higher inosine concentration groups was respectively 101.4%,101.8% and 101.1%(n=2) with RSD of 0.46%.  Conclusion  The method is simple,rapid and accurate.

    【Key words】  inosine injection;HPLC;concentration determination 

    肌苷为微生物发酵制得的辅酶类药物，有改善机体代谢作用，临床用于各种类型的肝脏疾患、心脏疾患、白细胞和血小板减少症、中心视网膜炎及视神  经萎缩等。有关标准规定  ［1］，注射用肌苷含量测定采用紫外分光光度法，该方法操作复杂、费时且专属性差。为了有效地分离降解产物，准确测定注射用肌苷含量，本文采用高效液相色谱法（HPLC）测定注射用肌苷中肌苷含量，获得满意结果。

    1  仪器与试药

    高效液相色谱仪：DIONEX P680 HPLC PUMP泵；DIONEX UVD170U紫外检测仪；Chromeleon Server Monitor工作站。

    肌苷对照品（含量99.2%，中国药品生物制品检定所），注射用肌苷分别为山西（规格：0.3g批号20060101；2006126）；海南（规格：0.2g批号20051201）。甲醇为色谱纯，试验用水为重蒸馏水。

    2  色谱条件

    色谱柱：Kromasil C18(5μm 4.6mm×250mm);流动相：甲醇-水（10：90）；检测波长为248nm；流速1.0ml/min；柱温为25℃；进样量20μl。

    3  线性关系的考察

    3.1  对照品储备液的制备  精密称取对照品10.58mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。

    3.2  标准曲线的绘制  精密吸取对照品储备液1.0、2.0、3.0、5.0、10.0、15.0ml，分别置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl，依法测定。以各溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制工作标准曲线，肌苷的线性回归方程为Y=0.726X+0.068（r=0.9999,n=6),在4.23～63.48μg/ml浓度范围内呈现良好的线性关系。

    4  精密度试验

    取含量测定项下肌苷对照品溶液20μl注入液相色谱仪，重复进样5次，测定峰面积，结果肌苷峰面积的RSD为0.14%（n=5)，表明本法精密度良好。

共2页: 1 [2] 下一页