2.3 方法
用微量肉汤稀释法测3种抗生素对30株嗜麦芽寡养单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)，判断标准按美国CLSI/NCCLS(2005年)标准。微量液体平板棋盘法：每种药物最高浓度为其MIC的2倍，倍比稀释到其MIC的1/16，分别沿无菌微孔板横轴、纵轴加不同浓度的两种药物的MH肉汤50μl，再将1.5×105CFU/ml菌液100μl加入孔中，37℃过夜培养，观察结果，记录单独应用2药的最低抑菌浓度MIC甲药单用和MIC乙药单用，并选择最佳组合效应时两药联合应用时各自的MIC甲药联用和MIC乙药联用，以计算FIC指数。
2.4 FIC指数计算与判读标准
FIC指数=MIC甲药联合MIC甲药单用+MIC乙药联合MIC乙药单用
FIC指数≤0.5为协同作用，＞0.5～1为相加作用，＞1～2为无关作用，＞2拮抗作用。
3 结果
3.1 MIC值
复方磺胺甲口恶唑与替卡西林/克拉维酸或头孢哌酮/舒巴坦单用与联合应用对嗜麦芽寡养单胞菌的MIC结果见Tab.1。从Tab.1可见，SMZ/TMP分别与TIPC/CA或CPZ/SB联用后，MIC均显著低于单独应用，表明抑菌作用增强。
3.2 药物浓度累积抑菌率
复方磺胺甲口恶唑与替卡西林/克拉维酸或头孢哌酮/舒巴坦单用与联合应用浓度累积抑菌百分率曲线见Fig.1及Fig.2。
3.3 FIC
复方磺胺甲口恶唑与替卡西林/克拉维酸或头孢哌酮/舒巴坦联合应用的FIC指数分布见Tab.2。复方磺胺甲口恶唑与替卡西林/克拉维酸联合应用，FIC范围主要在0～1以协同和相加为主；与头孢哌酮/舒巴坦联合应用，FIC范围主要在0.5～1以相加为主。
4 讨论
嗜麦芽寡养单胞菌是全球关注的8种多重耐药菌株之一。由于其外膜通透性低，可诱导型β内酰胺酶L1、L2的存在、主动外排系统及变异迅速等多种耐药机制，对多数抗生素天然耐药，治疗相当困难。复方磺胺甲口恶唑对嗜麦芽寡养单胞菌的敏感性较高，但该药为抑菌剂，单用易产生耐药性。最近的研究表明，其耐药性有明显增加趋势［2］，并与Ⅰ型整合子的存在有关［3］。成，已广泛应用。磺胺增效剂可与二氢叶酸还原酶(DHFR)相互作用，而磺胺甲口恶唑则与二氢喋啶氨苯甲酸(dihydropteroate)合成酶(DHPS)相互作用，使细菌DNA合成受阻，抑制细菌的生长。1972年首先报告了革兰阴性细菌中由质粒介导的Tmpr耐药性。这是对磺胺增效剂不再敏感的DHFR所引起的。此种新的DHFR与染色体DHFR无关，其来源和多数革兰阴性菌中获得性DHFR的来源均不清楚。目前在革兰阴性兼性厌氧杆菌中已发现了16种不同型别的耐药性DHFR。其中许多与转座子或DNA序列组件有关。
近年来，细菌耐药性的逐年上升和耐药性快速传递已经成为临床感染性疾病治疗的难题。文献报道Ⅰ型整合子和磺胺耐药基因的存在是导致磺胺耐药的主要原因［4］。整合子是细菌基因组中可移动性遗传物质，Ⅰ型整合子可以整合一个或多个耐药基因盒，从而形成多重耐药，它介导的耐药机制传播的快，能增加磺胺的MIC［4］，表明复方磺胺甲口恶唑的应用会受到一定限制。所以单用药物往往不能有效控制感染，从而使联合用药成为必然。Zelenitsky等［5］报道对于嗜麦芽寡养单胞菌感染，单独应用时复方磺胺甲口恶唑的敏感性最高，抗菌药物合理联合应用后对嗜麦芽寡养单胞菌的抑菌作用显著优于单一的抗生素应用。
本实验表明，复方磺胺甲口恶唑与替卡西林/克拉维酸或头孢哌酮/舒巴坦联合应用，可优于单药使用，体外抗菌活性明显增加，各自的MIC值均显著降低，联合应用后比单独应用浓度累积抑菌百分率曲线明显左移，效应增强，以协同和相加作用为主，复方磺胺甲口恶唑和替卡西林/克拉维酸联合应用协同和相加作用占80%，复方磺胺甲口恶唑与头孢哌酮/舒巴坦联合应用协同和相加作用占83.3%，其机制可能为两类药物作用于细菌的不同靶位。因此，在治疗嗜麦芽寡养单胞菌感染中建议将替卡西林/克拉维酸或头孢哌酮/舒巴坦与复方磺胺甲口恶唑联合应用以提高疗效，减少耐药株产生。
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