p16INK4A和bcl2蛋白在CIN和宫颈鳞癌中的表达(1)-找论文网

作者：石新兰，黄利鸣，黎家华

【摘要】 目的探讨p16INK4A和bcl2在宫颈上皮内瘤(CIN)和宫颈鳞癌的表达状态及其在病理诊断中的意义。方法采用免疫组化SP法对39例CIN、24例浸润性宫颈鳞癌和20例正常宫颈组织进行p16INK4A和bcl2检测。结果正常宫颈组织不表达p16INK4A，CINⅠ阳性表达率很低并为局灶表达，但几乎所有的CINⅡ/Ⅲ和浸润性宫颈鳞癌均弥漫大量表达p16INK4A。正常宫颈组织只有基底细胞层表达bcl2蛋白，CINⅢ和Ⅰ～Ⅱ期浸润癌bcl2阳性细胞弥漫分布，阳性表达率分别为53.8%和57.1%。Ⅲ～Ⅳ 期浸润癌bcl2阳性率下降，阳性细胞局限。结论 p16INK4A过表达与宫颈鳞癌恶性特性密切相关，检测p16INK4A有助于及时发现高级别CIN和宫颈鳞癌。

【关键词】 p16INK4A蛋白；bcl2蛋白；宫颈鳞癌；宫颈上皮内瘤

　　The Expression and Value of p16INK4A and bcl2 in Cervical Intraepithelial Neoplasia and Cervical Squamous Carcinoma

　　Abstract：Objective To study the expression and value of p16INK4A and bcl2 in CIN and cervical squamous carcinoma.Methods 39 cases of CIN, 24 cervical invasive squamous carcinoma and 20 normal cervical tissues were stained for p16INK4A and bcl2 by immunohistochemistry method. Results p16INK4A immunoreactivity was absent in all normal cervical tissues, its positive rate in CINⅠ was very low too, but p16INK4A expressed almost in all of CIN Ⅱ/Ⅲ and invasive carcinoma. Bcl2 immunoreactivity in normal cervical tissues was only seen in cells of basal layer. Its positive rate in CIN Ⅲ and Ⅰ～Ⅱ stage invasive carcinoma were 53.8%and57.1% respectively, which positive cells were diffuse and its staining intensity was higher than in normal cervical tissues. Its positive rate in Ⅲ～Ⅳ stage invasive carcinoma was striking decreased, which positive cells were focal. Conclusion p16INK4A over expression may be seen as a marker of CIN Ⅱ/Ⅲ and invasive carcinoma which is useful in pathological diagnosis.

　　Key words：p16INK4A protein；bcl2 protein；Cervical squamous carcinoma; CIN

　　0 引言

　　绝大多数宫颈鳞癌由宫颈上皮内瘤（CIN）发展而来，及时、正确诊断和治疗CIN，特别是CINⅡ/Ⅲ，是降低宫颈鳞癌发病率和死亡率的有效措施。对高级别CIN和典型的宫颈鳞癌不难做出正确的病理诊断，但如何准确鉴别CINⅠ和CINⅡ却存在着一定的困难，鳞状上皮化生与高级别CIN从形态上也有一定的相似性，有时也容易出现误判。因此，寻求特异性分子标记物是客观、准确诊断CIN所必需。研究表明p16INK4A特异性地表达于高级别CIN和宫颈鳞癌，并能间接地抑制bcl2表达，从而诱导宫颈癌的发生 [13]。本研究对正常宫颈、各级CIN和浸润性鳞癌组织进行了p16INK4A和bcl2免疫组化染色，以探讨p16INK4A和bcl2在宫颈鳞状上皮的表达状态及其临床意义。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　收集三峡大学第二临床医学院病理科近10年宫颈手术或活检标本83例，其中，正常宫颈20例，CIN39例，浸润性宫颈鳞癌24例。术前均未进行针对肿瘤的特殊治疗。福尔马林固定，石蜡包埋，病理医师确诊。浸润性宫颈鳞癌按1995年FIGO标准分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期。

　　1.2 试剂与方法

　　采用免疫组化SP法，即用型鼠抗人p16INK4A单抗、鼠抗人bcl2单抗及免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。用已知染色阳性的宫颈组织切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。操作步骤严格按照试剂盒说明进行，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固。

　　1.3 结果判断

　　p16INK4A定位于细胞质和细胞核，bcl2定位于细胞质，以光镜下出现棕黄色颗粒为阳性染色。结合阳性细胞数目和分布范围进行结果判定。p16INK4A判定标准为：观察5个高倍视野，阳性细胞数少于观察细胞总数的10%为阴性表达；超过观察细胞总数的10%但局限于上皮下1/3层为阳性表达；超过观察细胞总数的10%并分布范围超过上皮下1/3层为强阳性表达。bcl2判定标准为：观察5个高倍视野，阳性细胞数少于观察细胞总数的10%为阴性表达；超过观察细胞总数的10%为阳性表达。统计学处理采用χ2检验。

　　2 结果

p16INK4A在正常宫颈鳞状上皮不表达，13例CINⅠ仅有2例局灶表达，所有的CIN Ⅱ/Ⅲ均表达p16INK4A，24例浸润癌仅1例无p16INK4A表达。CINⅢ和浸润癌阳性细胞均呈弥漫分布。

正常宫颈鳞状上皮基底细胞层都表达bcl2，而基底细胞层以外的鳞状上皮都不表达bcl2。CINⅠ/Ⅱ bcl2仍只表达于基底细胞层。CINⅢ和Ⅰ～Ⅱ期浸润癌bcl2阳性表达率高而阳性细胞弥漫分布。Ⅲ～Ⅳ 期浸润癌bcl2阳性表达率下降而阳性细胞局灶分布，见表1。表1 宫颈组织p16INK4A和bcl2表达与临床病理因素的关系（略）

　　3 讨论

在科技迅猛发展的今天，病理诊断仍然是疾病诊断的金标准，发挥着指导治疗和判断预后的作用。但是，病理诊断在很大程度上依赖于病理医生的阅片经验。因此，经常出现病理医生之间诊断意见不一致的现象。虽然病理医生对CIN和宫颈鳞癌的组织学特征很熟悉，但病理诊断的不一致率仍然很高。Klaes等 [4]发现CINⅡ病理诊断一致率仅为35%，非典型增生以外的宫颈病变病理诊断一致率仅为3%。可见，为了准确对宫颈组织切片和细胞涂片进行病理诊断，病理工作者必须寻找有效而客观的诊断指标。

共2页: 1 [2] 下一页

PTEN、MMP7、VEGF在骨巨细胞瘤中的表达

OPCML对卵巢癌细胞抑制的体内外实验研究