作者：张俊峰，陈规划，陆敏强，李华，蔡常洁，杨扬，陈伟
【摘要】 目的 探讨环孢素Ａ(Cyclosporine A, CsA)对阿霉素（Adriamycin, ADM）治疗肝癌的影响。方法 培养HepG2肝癌细胞，分成对照、CsA、ADM、CsA+ADM组，分别处理24～48h，采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡。结果 肝癌细胞增殖能力48h明显受到抑制， CsA在5～1000μｇ/L随浓度增加,凋亡率逐渐增加，超过该浓度时, 则出现凋亡率减低。CsA、及ADM均使G2期显著延长； CsA对HepG2肝癌细胞有促进细胞凋亡作用，与ADM有协同促调亡作用。结论 环孢素Ａ对肝癌增殖有抑制作用,使Ｇ2期阻滞,促凋亡。环孢素Ａ联合阿霉素对肝癌治疗有协同作用。
【关键词】 肝细胞癌 环孢菌素 阿霉素；细胞增殖
Influence of Combined Cyclosporine A with ADM on Hepatocellular Carcinoma
Key words：Human hepatocellular carcinoma cell line; Cyclosporine A; Adriamycin;Cell proliferation
环孢素Ａ(CsA)为目前肝移植术后基本抗免疫排斥药。阿霉素为肝癌常用的有效化疗药物， CsA等免疫抑制剂与阿霉素联合应用是否会增加肝癌复发一直困扰着移植外科医师。我们对此进行了深入研究，探讨其对肝癌肝移植术后应用的安全性。
1 材料与方法
1.1 材料 DNA细胞周期及细胞凋亡流式细胞检测试剂盒（BD公司）、环孢素Ａ(CsA)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)。荧光定量仪PE 7000全自动荧光定量PCR仪购于美国Perkin Elmer公司;流式细胞仪购于BD公司。
1.2 细胞培养 人肝癌细胞HepG2购自中山大学细胞库，常规培养于DMEM完全培养液内(含10%小牛血清、100μｇ/ml青霉素和100μｇ/ml链霉素，pH7.2)，置37℃及5%CO2孵箱中培养，选对数生长期的细胞用于实验。
1.3 实验分组 CsA设为5、10、100、500、1000、5000μｇ/L，ADM设为1000μｇ/L，分成对照、CsA、ADM、CsA+ADM组。HepG2细胞分别经过24、48h处理后检测。
1.4 MTT比色法实验 取96孔细胞培养板加入相同数目细胞,培养24h,细胞贴壁,分别将FK506、CsA处理的相同数目细胞加入各个孔，同时设3个复孔，分别置于37℃、5%CO2孵箱中培养24h、48 h后，然后每孔加入15μl MTT染液，在37℃、5%CO2孵箱中培养4～6 h，每孔加入10%SDS的盐酸溶液，再置孵箱中培养过夜，最后在酶联检测仪波长570nm测OD值。
黄芪增免散对围手术期食管癌组织Langerhans细胞的影响
抗肝癌hdsFv融合RCRNase重组免疫毒素的表达、纯化及活