作者:彭海燕,章永红,杨早,叶丽红,张晓春,任凤梅
【关键词】 豆楮方;,,艾氏腹水癌;,,小鼠;,,生命延长率
摘要:目的观察豆楮方对艾氏腹水癌(EAC)腹水型小鼠的体内作用。方法昆明种小鼠50只随机分为5组:模型阴性对照组(A)、5Fu阳性对照组(B)、豆楮方高剂量组(C)、豆楮方中剂量组(D)、豆楮方低剂量组(E)。小鼠腹腔接种EAC后连续8 d灌胃给药,1次/d,观察并记录动物体重、一般情况及死亡时间。 结果与模型组比较,豆楮方各剂量组荷瘤小鼠的一般情况较好且生存时间明显延长。结论 豆楮方具有抗EAC腹水的作用。
关键词:豆楮方; 艾氏腹水癌; 小鼠; 生命延长率
豆楮方是20世纪70年代江苏著名中医肝病专家邹良材的经验方,一直用于“阴虚鼓胀”证的治疗,我们在临床观察到本方对肝硬化腹水[1]、肝癌腹水[2]具有显著的治疗效果,并采用艾氏腹水癌(EAC)腹水型小鼠模型,进行了本方对小鼠腹水癌生长及其生存期影响的实验。现报道如下。
1 材料
1.1 动物昆明种健康成年小鼠50只,均为雄性,平均体重(19.2±1.49) g,由南京中医药大学实验动物中心提供。
1.2 瘤株EAC瘤株由江苏省肿瘤医院药理实验中心提供,7~10 d传代1次,在腹腔传递3次后开始正式实验。
1.3 药物豆楮方由黑料豆、楮实子等组成,由本校中药学院进行严格的质量控制,按临床用药比例配方,水煎、过滤、浓缩至含生药为2.0 g/ml的药液,高压灭菌,4℃存放备用。5Fu,250 mg/支,天津金耀氨基酸有限公司,批号0311171。参考文献用量[3],用生理盐水稀释,按小鼠体重30 mg/kg腹腔注射用。
2 方法
2.1 肿瘤接种在无菌条件下,选择接种后7~10d一般状况较好的瘤种动物,仰卧固定,消毒皮肤,抽取腹水,用0.9%生理盐水稀释成1∶3的溶液,取上述腹水,每只小鼠腹腔注射0.2 ml。
2.2 分组给药 遵循随机原则,分为5组,每组10只:模型阴性对照组(A)、5Fu阳性对照组(B)、豆楮方高剂量组(C)、豆楮方中剂量组(D)、豆楮方低剂量组(E)。自造模第2天起给药:A组每天灌服生理盐水0.3ml;C,D,E组分别每天予浓度为2.0,1.0,0.5 g/ml的豆楮方药液0.3 ml灌胃;B组每天按小鼠体重30 mg/kg腹腔注射5Fu溶液0.2 ml。
2.3 观察指标观察各组小鼠的一般情况,定时称重量,记录各组小鼠生存天数,计算生命延长率,并经统计学处理。参考文献[4],计算公式为:
生命延长率=(试验组平均生存日-对照组平均生存日) 对照组平均生存日×100%
3 结果
3.1 小鼠的一般情况对比模型阴性对照组(A)小鼠在接种EAC癌细胞后腹部增大速度最快,7 d左右即可见腹部明显增大,其余各组7 d后才见小鼠腹部逐渐增大,较A组为慢。在用药过程中,豆楮方组(C,D,E)小鼠的活动力、进食、精神状况均较好,表现为活动力强,食欲旺盛,精神尤佳,整个用药过程中未见小鼠异常活动。而5-Fu组(B)与A组小鼠均见毛发较稀疏,不整齐,无光泽,食欲下降,活动能力较差。在观察中发现,给予豆楮方的小鼠尿量明显增加,垫料潮湿需每天更换,而A,B组小鼠尿量较少。
3.2 小鼠的体重对比 从体重的增长情况看,艾氏腹水癌的潜伏期为4~6 d,生长旺盛期从第7天开始,此时,由于腹水形成,荷瘤小鼠的体重增长迅速,证明本实验的诱瘤率为100%。5Fu及豆楮方组小鼠的体重增长速度均较模型阴性对照组减缓。结果见表1。
表1 各组小鼠体重变化对比(略)
3.3 小鼠的生存期对比经腹腔接种EAC癌细胞悬液后,模型阴性对照组小鼠一般在12 d左右死亡,说明实验条件稳定,符合评定标准。经用豆楮方或5-Fu后的小鼠,与模型阴性对照组比较,存活时间均不同程度地延长,尤以豆楮方中、高剂量组为明显。各组小鼠的平均生存时间及生命延长率见表2。
表2 各组小鼠生存期对比(略)
与空白对照组比较,*P <0.05,**P<0.01