【摘要】 目的:观察滋阴潜阳解毒通络饮对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞外基质(Ⅰ、Ⅲ型胶原)的影响,探讨高血压左心室肥厚的中医发病机理及改善左心室肥厚的可能机制。方法:以自发性高血压大鼠为模型,分为对照组、依那普利组、中药大、中、小剂量组分别灌胃相应药物。观察左心室重量指数及心肌形态学改变,用免疫组化方法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。结果:16周龄SHR大鼠对照组左心室重量指数明显高于中药高、中剂量组与依那普利组。对照组心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原显著增加,而依那普利组、中药大、中剂量组均对其有抑制作用。结论:高血压左心室肥厚的中医发病机制可能与毒损心络相关。降低心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原可能是滋阴潜阳解毒通络饮改善高血压左心室肥厚机制之一。
【关键词】 左心室肥厚 滋阴潜阳 解毒通络 自发性高血压 大鼠 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
基金项目:吉林省科技厅项目课题(编号:20050569) 原发性高血压(Essential Hypertension,EH)是我国最常见的心血管疾病之一,临床表现为原因不明的体循环动脉血压持续增高,常伴有不同程度的心、脑、肾等脏器病变,约有25%-30%高血压患者合并左心室肥厚(Lefe Ventricular Hypertrophy LVH),它主要表现为左心室肥厚(LVH)、左室舒张功能减退及冠状动脉血流异常。LVH是导致心脏猝死、心肌缺血、心律失常、心力衰竭等心血管事件增多的重要因素[1]。本研究通过实验观察滋阴潜阳解毒通络饮对自发性高血压大鼠(SHR)左心室肥厚及心肌细胞外基质(Ⅰ、Ⅲ型胶原)的影响,以阐明其作用机理,说明高血压左心室肥厚与毒损心络机理相关,为中药治疗高血压左心室肥厚提供理论依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 10周龄自发性高血压大鼠50只,雄性,体重(220±30)g,由中国医学科学院试验动物研究所提供。
1.2 药品与主要试剂 滋阴潜阳解毒通络饮由江阴天江药业有限公司生产的单味中药浓缩颗粒组成:生地20 g,钩藤20 g,夏枯草20 g,白芍20 g,赤芍20 g,丹参20 g,黄连15 g,菊花12 g,龙胆草12 g,三七9 g,代赭石30 g,煅牡蛎30 g。批号:0107022;马来酸依那普利由扬子江药业集团江苏制药股份有限公司提供,批号:0608301。Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化试剂盒,由博士德生物工程有限公司提供。
1.3 主要实验仪器 BP6动物无创血压测试仪(成都泰盟科技有限公司)。Olympus显微镜,LEICA自动脱水机,包埋机,自动切片机,电子秤,Olympus电子成像系统。
2 实验方法
2.1 分组方法 筛选血压高于140 mmHg的SHR大鼠,随机分成对照组、依那普利组、中药高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只。
2.2 给药方法 各组按正常人(60 kg体重)与大鼠给药剂量折算,中药大中小剂量配成浓度为33%,16.5%,8.25%的悬液,依那普利组配成28%的悬液,空白组给予蒸馏水,各组适应性饲养1周后,按1.5 mL·100g-1体重灌胃给药5周。16周后观察以下各指标。
2.3 主要观察项目及方法
2.3.1 左心室重量指数 先测大鼠体重(BW),腹腔麻醉,抽取血标本后开胸取心脏,冰冷生理盐水充分灌洗,除去大血管、心房、心外膜脂肪组织,滤纸吸干水分,称左心室湿重(LVW,含室间隔),以左心室重/体重(LVW/BW)值为心室重量指数(LVWI)。
2.3.2 心肌组织病理形态学观察 取左心室中部冠状切面心肌组织,常规固定、脱水,透明,浸蜡,包埋和切片,进行HE染色。
2.3.3 检测心肌组织ColⅠ、ColⅢ 采用免疫组化法。显微镜下观察:棕黄色者为阳性,图像分析:选择200倍视野每张免疫组化片随机选5个视野,测量阳性表达的平均光密度值,再测阳性表达的面积,计算免疫组化指数=(阳性面积×光密度)/100。
2.4 统计学处理 各组数据以均数±标准差(±s)表示,采用SPSS 11.5版软件进行统计分析,两组间比较用t检验,多组间比较用单因素方差分析,P<0.05为有统计学意义。