独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液白细胞介素-1和肿瘤坏死因子的影响(1)

        作者：刘英杰 马利杰 王相利    

【摘要】  目的 观察独活寄生汤对兔膝骨性关节炎中白细胞介素-1(IL-1) 和肿瘤坏死因子(TNF) 表达水平的影响，探讨其治疗骨性关节炎的机制。方法 将24只兔随机分为2组，即对照组和治疗组，各12只，24个膝关节，采用兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨关节炎的病理模型，以独活寄生汤浓缩液喂食饲养，于治疗后1、3、5 周分别抽取关节液，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，分别测定兔膝关节液中IL-1及TNF 表达水平。结果 治疗后1周，膝关节关节液中即可检测到IL-1及TNF的表达，对照组在3周时达到高峰，5周时略有回落。治疗组数值与对照组比较均见下降，1周时下降差异无统计学意义（P＞0.05），3、5周时下降差异有统计学意义（P＜0.01，P＜0.05）。结论 独活寄生汤能降低骨性关节炎中IL-1及TNF 的表达水平。

【关键词】  骨性关节炎；独活寄生汤；白细胞介素-1；肿瘤坏死因子；   
　　【Abstract】Objective  To observe the effect of Duhuojisheng decoction on the expression of IL-1 and TNF from synovial fluid in rabbit with osteoarthritis. Methods  24 rabbits were randomly divided into control and treatment groups. There were 12 rabbits (24 articular genus) in every group. Osteoarthritis model was established by injection of caroid in articular genu intracavitary. Rabbits with osteoarthritis were interfered by Duhuojisheng decoction. The expression of IL-1 and TNF from synovial fluid in rabbit with osteoarthritis were measured by double antibody sandwich ELISA 1, 3, 5 weeks after treatment. Results  There were expression of IL-1 and TNF from synovial fluid a week after treatment. Following weeks expression of IL-1 and TNF raised in control group. In 3 weeks peak appeared. Expression of IL-1 and TNF raised in treatment group decreased compared with those in control group (P<0.01, P<0.05). Conclusion  Duhuojisheng decoction can depress the expression of IL-1 and TNF in osteoarthritis.
   
　　【Key words】Osteoarthritis; Duhuojisheng decoction; Interleukin-1; Tumor necrosis factor; Rabbit

    骨关节炎是骨伤科临床常见病、多发病，主要表现为关节疼痛、僵硬及功能障碍，其主要病理特征是关节软骨退变及相应炎性改变，发病较为缓慢，是一种严重影响老年人健康的疾病。目前，常用的治疗方法有中西医之分，西医以服用非甾体消炎药消炎止痛缓解症状为主，中医中药则活血化瘀、通经活络辨证施治。中医学认为，长期劳损、血瘀气滞、风寒湿邪、痹阻经络、肾虚等因素致使骨髓空虚，血气亏损，筋骨失其所养，易于损伤，感受外邪而发为痹，故骨性关节炎为痹证，可通过补肾通络法治疗。独活寄生汤具有祛风湿、止痹痛、益肝肾、补气血的功效，常用于治疗风湿痹痛等病症，对骨性关节炎有较好的治疗作用。近年来研究发现骨性关节炎与众多炎性因子有关，其中白细胞介素( IL-1) 及肿瘤坏死因子(TNF)是参与骨关节炎进程的重要介质。我们通过观察兔膝关节液中IL-1 及TNF在独活寄生汤治疗前后的变化，探讨独活寄生汤治疗骨性关节炎的机制。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验动物及分组 

　　4～6个月龄健康大耳白兔24只，体质量2.5～3.5 kg，雄雌不限,华北煤炭医学院动物中心提供，合格证号:2006-04。随机分为对照组、治疗组，各12 只。

　　1.2  造模方法

　　按照日本头康彦等［1］的兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶，造成骨关节病变模型方法。将兔用戊巴比妥钠(30 mg/kg，静脉注射) 麻醉后双后腿膝关节周围剃毛，然后用10 %异丙醇消毒皮肤，轻弯曲膝关节，经关节正中或两侧进针，将1.6%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.5 mL通过髌上韧带注入兔膝关节腔，隔日1次，连续注射3次。

　　1.3  给药 

　　以独活寄生汤(《备急千金要方》)为基本方配制方剂［2，3］，煎煮40 min并浓缩，含生药5 g/mL，造模后2周开始，以15 mL（浓缩药液）/kg(体质量)掺拌于食物中，每只兔分笼饲养，确保药物全量食入。对照组用等剂量0.9%氯化钠注射液拌食。

　　1.4  检测方法 

　　于治疗后1、3、5周，抽取各组兔关节液，用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) 检测IL-1 及TNF含量。

　　1.5  统计学方法 

　　数据用均数±标准差(±s)表示，2组各时间点数据进行两样本间t检验。

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