【摘要】 目的：建立肾宁颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用C18(4.6mm×250mm，5μm)柱,流动相为乙腈水冰醋酸(30:70:1)，检测波长为202nm。结果：黄芪甲苷在15-300μg范围内线性关系良好，相关系数r=0.9995，平均回收率为97.95%，RSD为0.40%。结论：此测定方法准确，重现性好，可作为制剂的质量控制方法。
【关键词】 肾宁颗粒/化学合成;黄芪甲苷/标准;高效液相色谱法;含量测定
肾宁颗粒由黄芪、党参等４味中药组成，具有益气生阴，升清降浊，利尿通淋等功效，用于肾炎、蛋白尿等病证。为了更好控制其质量，本文采用高效液相色谱法对肾宁颗粒中的黄芪甲苷进行了含量测定［1］，现将结果报道如下。
1 材料
1.1 仪器 LC10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津)；ClassVER6.1工作站(日本岛津)；紫外分光光度计(UV2401 PC,日本岛津)；BS124 S电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
1.2 药品与试剂 肾宁颗粒由长春中医药大学制剂室提供；黄芪甲苷对照品(批号:0781200311)购于中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯，水为双蒸水,其他试剂为分析纯。
2 方法
2.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇配制成每1ml含黄芪甲苷0.15mg的溶液，即得。
2.2 供试品溶液的制备 取本品20g，研细，精密称定，加甲醇100ml，称定重量，加热回流提取2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液50ml，水浴浓缩至约5ml，加水15ml，加到D101型大孔吸附树脂柱(内径1.4cm，长15cm)上，用水200ml洗脱，弃去水洗脱液，再用30%乙醇200ml洗脱，弃去30%乙醇洗脱液，继续用70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液200ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.3 检测波长选择 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，于200-400nm波长下测定光谱图，在202nm处有最大吸收峰，检测波长选定为202nm。
2.4 色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－水－冰醋酸(30:70:1)为流动相；检测波长202nm；流速1ml/min。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000［2，3］。
在上述色谱条件下，对肾宁颗粒样品、黄芪甲苷对照品、阴性对照样品进行测定，结果表明，黄芪甲苷与杂质峰没有重叠，分离效果较好。
3 结果
3.1 黄芪甲苷线性关系考察 精密称取黄芪甲苷对照品适量,加甲醇分别制成每1ml含黄芪甲苷对照品1.5、7.5、15、22.5、30μg的溶液，分别吸取10μl,注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积为纵坐标(Y)，以浓度为横坐标(X)，绘制标准曲线，回归方程y=4856.4x＋199431.6，r=0.9995。黄芪甲苷在15-300μg范围呈良好的线性关系。
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