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固相多肽合成树脂的特征和进展(3)

  用丙烯酰-N-甲基甘氨酸甲脂(2-4)代替(2-3)解决了这些问题。这种功能化试剂和基本的单体(2-1)关系很接近,并且聚合可以不费力地得到漂亮的球体聚合物。另外,与(2-1)及(2-4)相似的结构似乎表明它们将以可比的速率聚合,这就提高了在整个树脂母体中官能团统一分配的相近程度。第二种树脂(2-5b)则有必要用一个后-聚合化学步骤将它转变成氨基聚合物(2-5c)。
   聚酰胺树脂在极性溶剂如DMF中溶胀至于体积的10倍,在水中更高;而在非极性的DCM中则膨胀得低得多了。从这处意义上讲,它们的特性与树脂相反。
   Sparrow JT等在制备聚酰胺树脂时用了一些功能单体:N-(2-(甲基磺酰基)乙酰羰基)-烯丙基胺(MSC-烯丙胺)、N-丙烯酰基-1,6-二氨基己烷HCl[8] ,或N-甲基丙烯酰基-1,3-二氨丙烷HCl[8] [9] 。树脂载荷0.15-1.4mmol/g。该树脂很适用于Fmoc化学合成。纯品肽可占粗品的80-95%,包括那些用传统PS树脂合成失败的氨基酸顺序。HaynieSL等准备了乙烯二氨修饰的聚酰胺树脂(Pepsn K),在上面合成出两亲性的多肽,并报道了这种多肽具有灭菌活性[10]。

3.聚乙烯-乙二醇类树脂
3.1 聚乙烯-乙二醇-接技聚苯乙烯(PEG-PS)
   它由不溶的PS母体构成,聚乙烯-乙二醇(PEG)链附着在上面。和以上讨论的聚酰胺树脂一样,它试图提高固相载体中肽链的溶剂化。研究过各种链长的PEG,但应用最成功是分子量在2000-3000Da之间的。
   近年来用机器合成多肽发展很快。机器合成包括半自动(间歇式)和自动(连续流动)两种形式,它与手工合成相比,具有快速、完全、方便等优点。而由于PEG-PS树脂一般都有较好的物理化学特性,如溶胀性,物理稳定性,在流动系统中抗磨和抗机械压力能力等,因而,它也随之发展起来。如Kate SA,McGuinners BF 等最近报道该实验室研究的“低载荷”(替代值 0.15-0.25mmol/g)和高载荷(0.3-0.5mmol/g)PEG-PS树脂的优点[11] 。

3.2 PEGA树脂及PEG类树脂的新应用
   PEGA树脂是由Morten Melder 发展起来的亲水性树脂,由PEG与酰胺基团交联而成[4] 。一般用于间歇式和连续流动多肽合成。它们的性质和PEG-PS树脂有很多相似之处,如NovaSyn? TG树脂(3-1),其平均珠体大小为90μm,每克树脂有2.86×106个小珠体。由于它特别适合应用于连续流动多肽合成。NovaSyn ?TGA树脂(3-2),是在PS载体基础上连枝PEG,能抵抗很高的流速,使它成为快速合成长链肽的理想选择。其它如NovaSyn ?TGA树脂(3-3),被一个极好的Rink接头功能化。这样用TFA处理肽-树脂可以很容易地得到多肽酰胺。另外注意到此树脂有一个自由氨基,这将增加产物保存时的稳定性;同时意味着不需要经过一个预先去保护循环,就可以直接连上第一个氨基酸。它们的替代值一般为0.2-0.3mmol/g。Rink酰胺PEGA树脂也被一个Rink接头功能化,和前面介绍的(3-3)性质相似:不过它有更高的替代值(0.3-0.4mmol/g)。
   近年来,PEG类型树脂(如PEGA)的一些新的应用越来越引起人们的兴趣。这些应用包括免疫学、树脂上酶合成及酶分析,和多肽文库的合成,而后者是发现新药物的强有力的工具。上述(3-1)就特别适合此类工作。
   Auzanneau FI等[12]研究了具有高含量PEG的三种类型的PEGA。树脂在从水到DCM的不同溶剂中膨胀很好,载荷为0.35mmol/g。他们在此树脂上合成出了几个高纯度的多肽,研究表明,作为相应的灭菌肽,它们有足够的致死活性。
   Renil M,Ferreras M等[13]合成出了两种类型的PEGA。由双/单-丙烯酰胺-PEG与丙烯酰胺PEG共聚,得出一个低交联度的树脂(类型I):进而,丙烯酰-肌氨酸乙酯与双-丙烯酰胺PEG共聚得到较多交联的树脂(类型II);载体在很广范围的溶剂中显示了高膨胀性,包括H2O、DCM、乙腈、TFA和甲苯。类型I通过单体组成的不同,给出的容量在0.07-1.0mmol/g之间,可应用于固相酶文库;用乙二胺处理类型II后,应用于连续流动多肽合成,且能给出相当好的产量和纯度。

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